בשנת 1607 הפכה ג'מסטאון ליישוב הראשון של האימפריה הבריטית בצפון אמריקה. מיקומו נבחר בשל היותו ניתן להגנה בקלות מכיוון שהיה מוקף משלושה צדדים על ידי מים, המים היו עמוקים מספיק לספינותיהם, והארץ לא הייתה מאוכלסת על ידי הילידים אמריקאים. עולי הרגל התחילו סלעים בחורף הראשון שלהם. למעשה, עברו מספר שנים עד שהמושבה הפכה לרווחית עבור אנגליה עם הצגת הטבק על ידי ג'ון רולף. בשנת 1624, ג'ייסטאון הפכה למושבה מלכותית. \
כדי לייצר את הזהב שציפו חברת וירג'יניה והקינג ג'יימס ניסו המתנחלים מפעלים רבים, כולל ייצור משי וייצור זכוכית. כולם נפגשו בהצלחה מועטה עד שנת 1613, אז פיתחו הקולוניסטים ג'ון רולף זן טבק מתוק ופחות טעים, שהפך לפופולארי במיוחד באירופה. סוף סוף המושבה הרוויחה רווח. טבק שימש ככסף בג'יימסטאון ושימש לשלם משכורות. בעוד שטבק התגלה כגידול המזומנים שעזר לג'יימסטאון לשרוד כל עוד התקיים, רוב האדמות צריכות לגדל אותו נגנב מאינדיאנים פוחאטאן הילידים וגידולו בכמויות בר קיימא היה תלוי בעבודת הכפייה של אפריקה עבדים.
ביוני 1606 העניק המלך ג'יימס הראשון, מאנגליה, לחברת וירג'יניה אמנת המאפשרת להקים יישוב בצפון אמריקה. הקבוצה של 105 מתנחלים ו 39 אנשי צוות הפליגה בדצמבר 1606 והתיישבה בג'יימסטאון ב- 14 במאי 1607. המטרות העיקריות של הקבוצה היו להתיישב
וירג'יניה, שלחו זהב חזרה הביתה לאנגליה ונסו למצוא מסלול אחר לאסיה.שלוש הספינות שלקחו המתנחלים לג'מסטאון היו סוזן קונסטנט, גילוי, ו מהירות אלוהים. ניתן לראות העתקים של ספינות אלה בג'יימסטאון כיום. מבקרים רבים המומים מהספינות הללו באמת היו קטנות. ה סוזן קונסטנט היה הגדול מבין שלוש הספינות, וסיפונו היה 82 מטר. הוא נשא 71 אנשים על סיפונה. היא חזרה לאנגליה והפכה לספינת סוחר. ה מהירות אלוהים היה השני בגודלו. המרפסת שלו הייתה 65 מטר. היא העבירה 52 אנשים לווירג'יניה. היא גם חזרה לאנגליה ועשתה מספר מעברים הלוך ושוב בין אנגליה לעולם החדש. ה גילוי היה הקטן מבין שלוש הספינות שדפקה היה 50 מטר. על הספינה היו 21 אנשים במהלך ההפלגה. זה הושאר לידי המתיישבים ונהג לנסות למצוא את מעבר צפון-מערב. זה היה על הספינה שהצוות של הנרי הדסון הוטעה, שלח אותו מהאוניה בסירה קטנה וחזר לאנגליה.
המתנחלים בג'מסטאון נתקלו בתחילה בחשדנות ובפחד מצד הקונפדרציה של פוחטן בראשות פוחטן. התכתשויות תכופות בין המתנחלים לבין ישראל אינדיאנים התרחש. עם זאת, אותם אינדיאנים היו מעניקים להם את הסיוע הדרוש להם בכדי לעבור את חורף 1607. רק 38 אנשים שרדו באותה השנה הראשונה. בשנת 1608, שריפה הרסה את מבצרם, מחסןם, הכנסייה וכמה מגורים. יתרה מזאת, בצורת הרסה את הגידולים באותה שנה. בשנת 1610 התרחשה שוב רעב כשהמתנחלים לא אחסנו מספיק מזון ורק 60 מתנחלים נותרו ביוני 1610 כשהגיע סגן מושל תומאס גייטס.
הישרדותו של ג'מסטאון נותרה בספק במשך למעלה מעשר שנים מכיוון שהמתיישבים לא היו מוכנים לעבוד יחד ולשתול יבולים. כל חורף הביא זמנים קשים, למרות מאמציהם של מארגנים כמו קפטן ג'ון סמית '. בשנת 1612, האינדיאנים של פוחטן והמתיישבים האנגלים הפכו לעוינים יותר זה בזה. שמונה אנגלים נלכדו. כנקמה, סרן סמואל ארגאל כבש את פוקהונטס. זה היה במהלך תקופה זו פוקהונטס פגש ונישא לג'ון רולף אשר זוכה בזכות נטיעת ומכירת יבול הטבק הראשון באמריקה. בשלב זה עם הצגת הטבק החיים השתפרו. בשנת 1614 התחתן ג'ון רולף פוקהונטס שבמקרה עזר לקולוניסטים לשרוד את החורף הראשון שלהם בג'יימסטאון.
לג'יימסטאון היה בית בורגס שהוקם בשנת 1619 ששלט במושבה. זו הייתה האסיפה המחוקקת הראשונה במושבות האמריקאיות. הבורגסיות נבחרו על ידי גברים לבנים שהחזיקו רכוש במושבה. עם ההמרה ל- מושבה מלכותית בשנת 1624, כל החוקים שהתקבלו על ידי בית בורג'ס נאלצו לעבור באמצעות סוכני המלך.
בג'יימסטאון היה שיעור תמותה גבוה במיוחד. זה נבע ממחלות, ניהול כושל גס ומאוחר יותר פשיטות אינדיאנים. למעשה, קינג ג'יימס הראשון ביטל את אמנת חברת לונדון לג'יימסטאון בשנת 1624, כשרק 1,200 מתיישבים מתוך סך 6,000 שהגיעו מאנגליה מאז 1607 שרדו. באותה נקודה הפכה וירג'יניה למושבה מלכותית. המלך ניסה להמיס את בית המחוקקים של בורגס ללא הועיל.
בניגוד לפוריטנים, שהיו מבקשים חופש דת בפלימות ', מסצ'וסטס 13 שנים אחר כך, מתיישבי ג'מסטאון הגיעו להרוויח. באמצעות מכירותיה הרווחיות ביותר של הטבק המתוק של ג'ון רולף, מושבת ג'יימסטאון הניחה את היסוד לאידיאל האמריקני הייחודי של כלכלה המבוססת על מפעל בחינם.
זכויותיהם של אנשים לרכוש נכסים השתרשו גם את ג'מסטאון בג'מסטאון בשנת 1618, כאשר חברת וירג'יניה העניקה למושבות את הזכות להחזיק בקרקע שהוחזקה בעבר בידי החברה בלבד. הזכות לרכוש אדמות נוספות מותרת לצמיחה כלכלית וחברתית.
בנוסף, הקמת בית הנבחרים של ג'מסטאון בבורגס ב 1619 הייתה צעד מוקדם לעבר המערכת האמריקאית של ממשלה מייצגת שהיוותה השראה לאנשים של כל כך הרבה מדינות אחרות לחפש את החירויות שמציעה דמוקרטיה.
לבסוף, מלבד המורשת הפוליטית והכלכלית של ג'מסטאון, האינטראקציה המהותית בין הקולוניסטים האנגלים, הפוחטן הודים ואפריקאים, חופשיים ועבדים כאחד, סללו את הדרך לחברה אמריקאית המבוססת ותלויה במגוון תרבויות, אמונות, ו מסורות.