חיץ נתרן ציטראט משמש לעיתים קרובות לבידוד RNA, מכיוון שהוא ממזער את הידרוליזה בסיסית של גדילי ה- RNA, מה שהופך אותו לא יסולא בפז לטיהור mRNA במהלך גנומית מחקר וללימוד תמלול. מאגרים מבוססי ציטראט מסייעים גם בזיהוי אנטיגנים בתכשירים ברקמות קבועות, מכיוון שהם שוברים את הקשרים הצולבים הנוצרים בין האנטיגנים לתקשורת הקיבוע.
בשלבים הקלים הבאים ניתן ליצור חיץ נתרן ציטראט עם pH של 6 (חומצי) תוך פחות מ -10 דקות.
חומרים למאגר נתרן ציטראט
מעט חומרים נדרשים כדי ליצור את מאגר הנתרן ציטראט. עם חומצה לימונית, אחד זקוק ל -1 מיליון נתרן הידרוקסיד, מים מזוקקים, ומבחן pH מכויל. נתרן ציטרט הוא לא חובה.
הפיכת החוצץ מצריכה גם צילינדר מדורג 1 ליטר, בקבוק נפח 1 ליטר ושלושה בקבוקי מדיה 1 ליטר. לבסוף, תזדקק למערבב מגנטי ומערבב מגנטי. ניתן למצוא את כל החומרים האלה בבית הספר, מעבדות באתר עבודה או לרכוש באופן מקוון או בחנויות למוצרים מיוחדים.
שתי אפשרויות להכנת המאגר
ישנן שתי שיטות להכנת מאגרי נתרן ציטראט, בהתאם לחומרים הנגישים עבורך.
- אם יש לכם גם חומצת לימון וגם בסיס מצומד, צרו תמיסת מלאי של כל אחד על ידי ערבוב של 21 גרם של חומצת לימון בליטר מים מזוקקים, ו 29.4 גרם נתרן ציטרט ב 1 ליטר מזוקק מים.
- אם יש לך רק חומצה לימונית בהישג יד, מערבבים 2.1 גרם במעט מתחת לליטר מים מזוקקים.
ערבוב של חומצות לימון וסודיום ציטראט
מערבבים 82 מיליליטר מתמיסת חומצת לימון עם 18 מיליליטר של תמיסת הנתרן ציטרט. לכך יש להוסיף מספיק מים מזוקקים בכדי להביא את נפח התערובת למעט מתחת לליטר.
התאמת ה- pH
תוך כדי בחישה עדינה של הפתרון בעזרת בחישה מגנטית, השתמש ב -1 M נתרן הידרוקסיד בכדי להתאים את pH התערובת ל 6.0. לאחר מכן, בעזרת בקבוק נפח, הוסיפו מים מזוקקים נוספים בכדי להביא את הנפח הכולל הסופי של הפיתרון לדיוק 1 ליטר.